Kompleti i testit të shpejtë të antigjenit të malaries Pf/Pan (ari koloidal)

Malaria është një sëmundje hemolitike, febrile e shkaktuar nga mushkonjat që infekton mbi 200 milion njerëz dhe vret më shumë se 1 milion njerëz në vit.Shkaktohet nga katër lloje të Plasmodiumit: P. falciparum, P. vivax, P. ovale dhe P. malariae.Të gjitha këto plazmodia infektojnë dhe shkatërrojnë eritrocitet e njeriut, duke prodhuar të dridhura, ethe, anemi dhe splenomegali.P. falciparum shkakton sëmundje më të rënda se speciet e tjera plazmodiale dhe përbën shumicën e vdekjeve nga malaria.P. falciparum dhe P. vivax janë patogjenët më të zakonshëm, megjithatë, ka ndryshime të konsiderueshme gjeografike në shpërndarjen e specieve.

Tradicionalisht, malaria diagnostikohet nga demonstrimi i organizmave në njollat ​​e trasha të gjakut periferik të ngjyrosur nga Giemsa, dhe llojet e ndryshme të plazmodiumit dallohen nga shfaqja e tyre në eritrocitet e infektuara1.Teknika është e aftë për një diagnozë të saktë dhe të besueshme, por vetëm kur kryhet nga mikroskopistë të aftë duke përdorur protokolle të përcaktuara2, gjë që paraqet pengesa të mëdha për zonat e thella dhe të varfra të botës.

Kompleti i Testit të Shpejtë të Antigjenit për Malaria Pf/Pan është zhvilluar për zgjidhjen e këtyre pengesave.Testi përdor një palë antitrupash monoklonale dhe poliklonale ndaj proteinës specifike të P. falciparum, proteinës së përsëritur të histidinës II (pHRP-II) dhe një palë antitrupash monoklonale ndaj plazmodiumit Lactate Dehydrogenase (pLDH), një proteinë e prodhuar nga katër llojet e plazmodiumit, duke mundësuar kështu zbulimin ose zbulimin e ndryshëm të infeksionit të plazmodiumit dhe ananea. tre plazmodia të tjera.Mund të kryhet nga personel i patrajnuar ose me aftësi minimale, pa pajisje laboratorike.

Kompleti i testit të shpejtë të malaries Pf/Pan është një analizë kromatografike me rrjedhje anësore.Komponentët e shiritit të provës përbëhen nga: 1) një jastëk konjugat me ngjyrë burgundy që përmban antitrup miu anti-pHRP-II të konjuguar me ar koloid (pHRP II-konjugate ari) dhe antitrupa anti-pLDH të miut të konjuguar me ar koloid (konjugate pLDH-ari),

2) një shirit membranash nitroceluloze që përmban dy breza testimi (bandat Pan dhe Pv) dhe një brez kontrolli (banda C).Shiriti i panit është i veshur paraprakisht me antitrup monoklonal anti-pLDH me anë të të cilit mund të zbulohet infeksioni me cilindo nga katër llojet e plazmodisë, brezi Pf është i veshur paraprakisht me antitrupa poliklonalë anti-pHRP-II për zbulimin e infeksionit Pf dhe brezi C është i veshur me IgG anti-miu dhie.

Gjatë analizës, një vëllim adekuat i mostrës së gjakut shpërndahet në pusin e kampionit (S) të kasetës së provës, një tampon lize shtohet në pusin buferik (B).Tampon përmban një detergjent që lizon qelizat e kuqe të gjakut dhe çliron antigjene të ndryshme plazmodiumi, të cilët migrojnë me veprim kapilar nëpër shiritin e mbajtur në kasetë.pHRP-II nëse gjendet në ekzemplar do të lidhet me konjugatët pHRP II-ari.Më pas, imunokompleksi kapet në membranë nga antitrupat anti-pHRPII të veshura paraprakisht, duke formuar një brez Pf me ngjyrë burgundy, që tregon një rezultat pozitiv të testit Pf.pLDH nëse paraqitet në ekzemplar do të lidhet me konjugatët e arit pLDH.Më pas, imunokompleksi kapet në membranë nga antitrupi anti pLDH i veshur paraprakisht, duke formuar një brez pan ngjyrë burgundy, që tregon një rezultat pozitiv të testit të plazmodiumit.Në mungesë të brezit Pan, mund të rekomandohet një rezultat pozitiv i testit për cilindo nga tre plazmoditë e tjera.

Mungesa e ndonjë brezi testimi (Pan dhe Pf) sugjeron një rezultat negativ.Testi përmban një kontroll të brendshëm (shirit C) i cili duhet të shfaqë një brez me ngjyrë burgundy të imunokompleksit të IgG kundër miut të dhisë / IgG të miut (pHRP-II dhe pLDH-konjugatet ari) pavarësisht nga zhvillimi i ngjyrës në cilindo nga brezat e testimit.Përndryshe, rezultati i testit është i pavlefshëm dhe ekzemplari duhet të ritestohet me një pajisje tjetër.